愈伤组织(愈伤组织)
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更新时间:2023-05-22
愈伤组织
愈伤组织(callus)是原指植物体的局部受到创伤刺激后,在伤口表面新生的组织。它由活的薄壁细胞组成,可起源于植物体任何器官内各种组织的活细胞。
介绍
黑暗培养下烟草愈伤组织
形成
在植物的组织培养中,从一块外植体形成典型的愈伤组织,大致要经历三个时期:启动期、分裂期和形成期。启动期指细胞准备进行分裂的时期。外源植物生长素对诱导细胞开始分裂效果很好。常用的有萘乙酸、吲哚乙酸、细胞分裂素等。通常使用细胞分裂素和生长素比例在1:1来诱导植物材料愈伤组织的形成。分裂期是指外植体细胞经过诱导以后脱分化,不断分裂、增生子细胞的过程。分裂期愈伤组织的特点是:细胞分裂快,结构疏松,颜色浅而透明。分化期是指在分裂的末期,细胞内开始出现一系列形态和生理上的变化,从而使愈伤组织内产生不同形态和功能的细胞。这些细胞类型有薄壁细胞、分生细胞、色素细胞、纤维细胞等等。外植体的细胞经过启动、分裂和分化等一系列变化,形成了无序结构的愈伤组织。如果在原来的培养基上继续培养愈伤组织,会由于培养基中营养不足或有毒代谢物的积累,导致愈伤组织停止生长,甚至老化变黑、死亡。如果要让愈伤组织继续生长增殖,必须定期地(2-4个星期)将它们分成小块“接种到新鲜的培养基上,这样愈伤组织就可以长期保持旺盛的生长。
培养
继承培养
在外植体上形成以后,愈伤组织的继代培养在已充分发育,但没有出现老化现象之前,应及时从外植体上分离下来,转入继代培养基上进行继代培养。分离是必要的措施,继代培养时若连同外植体就会影响愈伤组织的产量和质量,可能是由于残存的外植体在死亡过程中会产生某些有毒物质,愈伤组织会出现老化、粘化及不正常分化等现象。一般情况下,从外植体上分离的愈伤组织须经过4-6周的培养才能得到充分的发育。为了增殖发育良好的愈伤组织,继代培养是有效的措施。在良好的培养条件下,甘蔗愈伤组织可继代一年以上而不丧失分化能力。
菠萝的愈伤组织
分化培养
甘蔗愈伤组织在除去生长素或降低生长素浓度的培养基上,即能发生器官的再分化。在甘蔗的组织培养中,有些品种的愈伤组织对生长素有较强的吸收和分解能力,甚至在含有一定浓度生长素的诱导或继代培养基上亦能迅速分化成苗。影响甘蔗愈伤组织分化成苗的因素有愈伤组织的质量和大小、培养基、光照等。愈伤组织的大小对分化具有明显的影响,接种时愈伤组织块不宜小于5mm。
树的发达的愈伤组织
功能用途
愈伤组织
实际成果
类型
紧密型(compact):愈伤组织内无大的细胞间隙,细胞间被果胶质紧密结合,不易形成良好的悬浮系统。
松脆型(friable):愈伤组织内有大量大的细胞间隙,细胞排列无次序,容易分散成单细胞或少数几个细胞组成的小细胞团,是进行悬浮培养的最合适的材料。
两类愈伤组织通过激素调节可互相转变。
其方法是:加入高浓度的生长物质,可使坚实的愈伤组织变为松脆。反之,减少或除去生长物质,则松脆愈伤组织可以转变为坚实。
培养形成过程
从一块外植体形成典型的愈伤组织,大致要经历三个时期:起动期、分裂期和形成期。起动期是指细胞准备进行分裂的时期。用于接种的外植体的细胞,通常都是成熟细胞,处在静止状态。起动期是通过一些刺激因素(如机械损伤、改变光照强度、增加氧等)和激素的诱导作用,使外植体细胞的合成代谢活动加强,迅速进行蛋白质和核酸的合成。机械损伤能诱导植物体细胞开始分裂,如伤口上会出现愈伤组织。在植物组织培养中沿用了愈伤组织这一名词,但是植物组织培养中诱导外植体细胞分裂形成的愈伤组织,大都不是损伤的结果。外源的生长素类物质对诱导细胞开始分裂效果很好,因此生长素类物质在植物组织培养中得到广泛应用,常用的有2,4-二氯苯氧乙酸、萘乙酸、吲哚乙酸和细胞分裂素等。
处于分裂期的愈伤组织的特点是:细胞分裂快,结构疏松,颜色浅而透明。
外植体的脱分化因植物种类、器官来源及其生理状况的不同而有很大差别。例如,烟草、胡萝卜等植物的脱分化比较容易,禾本科植物的脱分化比较难;花的脱分化比较容易,茎、叶的脱分化比较难;幼嫩组织的脱分化比较容易,成熟的老组织脱分化比较难。
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愈伤组织长什么样?我们拆开一个嫁接口,给大家看一下