牛血清蛋白（牛血清中的球蛋白之一）

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更新时间：2023-05-22
牛血清蛋白
牛血清中的球蛋白之一
牛血清白蛋白（BSA），又称第五组分，是牛血清中的一种球蛋白，包含583个氨基酸残基，分子量为66.430 kDa，等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用，例如在western blot中作为Blocking agent。
基本信息
中文名
牛血清蛋白
外文名
Bovine albumin
词条分类性质
名词词组，偏正词组
中文同义词
简介
【词条中文名称】牛血清白蛋白
【中文同义词】蛋白粉；牛白蛋白；卵蛋白粉；血清蛋白；血清白蛋白；牛血蛋白质；复合氨基酸；牛血清蛋白；牛血清白蛋白；血清白蛋白（牛）
【词条拼音名称】Níuxuèqīng báidànbái
牛血清白蛋白
【词条英文名称】Bovine albumin
【词条英文别名】Bovine serum albumin
【词条英文同义词】nhsa;BSA-C;AC-BSA;ALBUMIN, PIG;albumenpowder;SERUM ALBUMIN;ACETYLATED BSA;BSA ACETYLATED;Bovine albumin;BSA, METHYLATED
【词条分类性质】名词词组，偏正词组
【词条适用范围】医学领域，药学领域
【CAS数字登录号】9048-46-8
BSA结构
CBNumber:
CB5107573
分子式：
N/A
英文别名：
Bovine serum albumin
化学性质
牛血清白蛋白
溶解度 : PBS: >40 mg/mL
form : lyophilized powder
Merck : 13,8542
稳定性：稳定，不兼容氧化剂：强酸 储存条件 : 2-8°C
用途介绍
1、生化研究、遗传工程和医药研究
2、医药保健食品、调味品
3、维持渗透压、pH缓冲、载体作用
生产方法
以 牛血为原料分离出血清，用硫酸铵分级沉淀后，经辛酸处理精制而得。
贮存方法
每10g加100ml水进行溶解，或用 PBS溶解也可，视用途而决定。然后分装成小支。若不使用防腐剂可贮存在零下20或30摄氏度的恒温柜中，若使用防腐剂（如0.1%叠氮化钠）则可贮存在零上4摄氏度的环境下。一般可存放数月不变质。防腐剂可能对牛血清白蛋白的效果造成影响，应慎用。
BSA结构
成分结构
牛血清中的简单蛋白，是血液的主要成分（38g/100ml），分子量68kD。等电点4.8。含氮量16%，含糖量0.08%。仅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成，其中35个半胱氨酸组成17个二硫键，在肽链的第34位有一自由巯基。白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。血液中的白蛋白主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用。在动物细胞无血清培养中，添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。
BSA作用
BSA一般做为稳定剂被用于限制酶或者修饰酶的保存溶液和反应液中，因为有些酶在低浓度下不稳定或活性低。加入BSA后，它可能起到“保护”或“载体”作用，不少酶类添加 BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不会受到什么影响。对多数底物DNA而言，BSA可以使酶切更完全，并可实现重复切割。在37℃，酶切反应超过1h时，BSA可以使酶更加稳定，因为在不含BSA的反应缓冲液中，许多限制性内切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的时间。而BSA可以结合缓冲液或底物DNA中抑制限制性内切酶活性的金属离子和其它化学物质。
牛血清蛋白
1.BSA是酶的稳定剂，防止酶的分解和非特异性吸附；
2.BSA能减轻有些酶的变性，能减轻有些不利环境因素如加热，表面张力及化学因素引起的变性，至于作用机理还不明确，可能是因为它结构中有17个二硫键和一个巯基，巯基的化学反应很活泼，二硫键有抗氧化还原的作用，因此可与多种阳离子、阴离子和小分子结合；
3.BSA能防止酶吸附到管壁而损失。
介绍
牛血清白蛋白分子式
牛血清白蛋白的相对分子质量为10的4次方这个级别，它不是一定的，而是多聚物的，有的地方测试 数据为70 000，这一数据是在做PCR的时候使用的数据。
牛血清白蛋白是血液中的主要成分（38g/100ml），分子量68kD，等电点4.8，含氮量16%，含糖量0.08%，仅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成，其中35个半胱氨酸组成17个二硫键，在肽链的第34位有一自由巯基。白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。
牛血清蛋白溶液可以作为测量蛋白质含量的标准曲线用。
一般买回来的牛血清蛋白是细小片状的乳白色粉末。牛的血清蛋白也以铁为基本原料。
用途
1、特纯级牛血清蛋白
电场対超感牛血清白蛋白截留率的影响
用途：用作酶标、金标等诊断试剂的封闭剂，生化试验等。
性状：淡黄色干燥粉末
2、无脂肪酸牛血清蛋白
用途：用作酶标、金标等诊断试剂的封闭剂、保护剂，尤其适用于容易受脂肪酸影响的产品和试验。
性状：淡黄色干燥粉末
3、无蛋白酶牛血清蛋白
用途：用于酶标、金标等诊断试剂的封闭剂、保护剂，尤其适合血液脂类的诊断试验、脂类诊断试剂及对纯度要求高的产品。
性状：淡黄色干燥粉末
4、细胞培养级牛血清蛋白
用途：无血清培养基的蛋白添加剂，供细胞培养使用。
性状：淡黄色干燥粉末白蛋白
测定
标准曲线
一般用分光光度法测物质的含量，先要制作标准曲线，然后根据标准曲线查出所测物质的含量。因此，制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。
测定方法
1. 凯氏定氮法
2. 双缩脲法
3. Folin-酚试剂法
4. 紫外吸收法
5. 考马斯亮蓝法
标准曲线制作
试剂
1. 考马斯亮蓝试剂：
考马斯亮蓝G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇，加入100ml 85% H3PO4，用蒸馏水稀释至1000ml,滤纸过滤。最终试剂中含0.01%（W/V）考马斯亮蓝G—250,4.7%（W/V）乙醇，8.5%（W/V）H3PO4。
2. 标准蛋白质溶液：
纯的牛血清血蛋白，预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，根据其纯度同0.15mol/LNaCl配制成100ug/ml蛋白溶液。
器材
1. 722S型分光光度计使用及原理。
2. 移液管使用。
制作步骤
试管编号 0 1 2 3 4 5 6
100ug/ml标准蛋白（ml） 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6
0.15mol/L NaCl （ml） 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4
考马斯亮蓝试剂（ml） 5 5 5 5 5 5 5
摇匀，1h内以1号管为空白对照，在595nm处比色
3、以A595nm为纵坐标，标准蛋白含量为横坐标（六个点为10ug、20 ug、30 ug、40 ug、50 ug、60 ug），在坐标轴上绘制标准曲线。
（1）、利用标准曲线查出回归方程。
（2）、用公式计算回归方程。
（3）、或用origin作图，测出回归线性方程。即A595nm=a×X( )+6
一般相关系数应过0.999以上，至少2个9以上。
(4）、绘图时近两使点在一条直线上，在直线上的点应该在直线两侧。
含量的测定
样品即所测蛋白质含量样品（含量应处理在所测范围内），依照操作步骤1操作，测出样品的A595nm，然后利用标准曲线或回归方程求出样品蛋白质含量。
一般被测样品的A595nm值在0.1—0.05之间，所以上述样品如果A595nm值太大，可以稀释后再测A595nm值，然后再计算。
注意事项
1. 玻璃仪器要洗涤干净。
2. 取量要准确。
3. 玻璃仪器要干燥，避免温度变化。
4. 对照：用被测物质以外的物质作空白对照。