双缩脲试剂(用于鉴定蛋白质的分析化学试剂)
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更新时间:2023-05-23
双缩脲试剂
用于鉴定蛋白质的分析化学试剂
基本信息
中文名 | 双缩脲试剂 |
外文名 | Biuret Reagent |
应用 | 检测含肽键的物质,包括双缩脲,蛋白质等 |
主要成分 | |
制作 | 0.1g/mL氢氧化钠或氢氧化钾、0.01g/mL硫酸铜和酒石酸钾钠配制而成 |
相关反应 | 双缩脲反应 |
收起
简介
血清蛋白测定(双缩脲法)试剂:球蛋白沉淀剂同上页酚试剂法。双缩脲试剂:硫酸铜(CuSO4·5H2O,三级试剂)1.5克,酒石酸钾钠(KNaC4H生O6·4H2O,三级试剂)6.0克2.5N氢氧化钠,300毫升,蒸馏水。将硫酸铜及酒石酸分别各以200毫升蒸馏水溶解,必要时过滤,全部倾入1,000毫升容量瓶中,混匀。再加入氢氧化钠溶液并以蒸馏水稀释至1,000毫升刻度。分装塑料或内壁涂蜡的试剂瓶,加塞密封,于室温保存。若溶液中出现暗红色沉淀即不宜再用。
配制
解释
双缩脲试剂是由双缩脲试剂A和双缩脲试剂B两种试剂组成.
具体方法是
先将双缩脲试剂A加入组织样液,摇荡均匀,在加入双缩脲试剂B,摇荡均匀。如果组织里含有蛋白质,那么会看到溶液变成紫色。
应用
双缩脲(NH3CONHCONH3)是两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中,双缩脲与CuSO4形成紫色络合物,称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键,或能过一个中间碳原子相连的肽键,这类化合物都有双缩脲反应。
H2O
O=CC=O
HNNH
R-CHCH-R
O=CCuC=O
HNNH
R-CHCH-R
H2O
试剂作用
双缩脲试剂可以验证蛋白质的存在。
具体方法是:
先将双缩脲试剂A加入组织样液,振荡均匀(必须营造碱性环境),再加入双缩脲试剂B,振荡均匀。如果组织里含有蛋白质,那么会看到溶液变成紫色。具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的络合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比。
双缩脲(NH2CONHCONH2)是两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物。
双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,因蛋白质中也有-CONH-基也可用于检验蛋白质,与蛋白质接触后的颜色呈紫色。
与双缩脲区别
双缩脲(NH2CONHCONH2)是两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物。
双缩脲试剂是由双缩脲试剂A和双缩脲试剂B两种试剂组成
双缩脲试剂A的成分是氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液;
双缩脲试剂B的成分是硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液。
双缩脲试剂可以验证蛋白质的存在,遇蛋白质产生紫色。
简单的说,双缩脲是一种化学物质,而检测蛋白质用的那两个试剂之所以叫双缩脲试剂,是因为检测原理和双缩脲的形成相似。